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HPLC样本检测及方法开发

服务介绍:

高效液相色谱,是液体样本被压力注入色谱柱,通过分析物与固定相相互作用不同,不同物质按照顺序离开色谱柱,通过检测器得到不同信号,具有高分离度,高重复性的优势。液相色谱在药物研发,环境分析,食品分析,临床医学等领域广泛应用,可完成纯度测定,复杂生物样品中分析物含量测定等。方法学开发的目的就是在热力学和动力学之间找到分析物的平衡点,以期来更好对样品中分析组分进行分离,相互定量不产生干扰。

主要设备:色谱仪 Agilent 1260 infinity Ⅱ

实验结果展示:

方法开发:

①含真实样本的方法开发:报告提供方法检测下限,线性范围(根据真实样本调整),样品检测结果,详细色谱条件,不做多基质条件的摸索;②不含真实样本的方法开发:已经完成方法开发,有成熟的方法-样本前处理-上机检测报告提供方法检测下限,上下限的倍数关系,详细色谱条件,不做基质条件的摸索。

实验流程:

标准品测量配制→标品预试→样品上机预试→调整仪器参数→验证线性倍数→验证基质干扰→完成方法开发→样本前处理→上机检测

送样运输要求:

1、细胞样本
①细胞量1×107个,收集细胞沉淀,-80℃保存,纯干冰运输,避免反复冻融。
②收集时,用预冷PBS缓冲液清洗三次,去除培养基成分,然后离心去除上清保存。
③如需要进行细胞计数,则需送样前进行。
2、全血样本
①样本量200 μL,EDTA、EDTA-K2或肝素钠抗凝,4℃保存,冰袋运输,避免剧烈振荡和冷冻结冰。
②由于全血常规保存期为7天,如需检测,需要提前至少1周联系实验室确认周期情况,以便沟通协调安排检测。
3、血清、血浆样本
①样本量100 μL,-80℃保存,纯干冰运输,避免反复冻融及溶血。
4、尿液样本
①样本量200 μL,-80℃保存,纯干冰运输,避免反复冻融及带入粪便残渣。
5、动物组织样本
①样本量300 mg,-80℃保存,纯干冰运输,避免反复冻融。
②收集时,用预冷PBS缓冲液冲洗表面血液,并用滤纸吸干多余水分,避免冻存时结冰。
③固定液浸泡过的样本无法进行检测。
6、植物组织样本
①样本量500 mg,-80℃保存,纯干冰运输,避免反复冻融。
②收集时,用预冷PBS缓冲液冲洗表面泥沙,并用滤纸吸干多余水分,避免冻存时结冰。
③固定液浸泡过的样本无法进行检测。
 

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