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分子蛋白

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质粒转化

服务介绍:

将外源DNA分子导入到受体细胞中,使之获得新的遗传特性的一种方法。将对数生长期的细菌(受体细胞)经理化方法处理后,细胞膜的通透性发生暂时性改变,成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞。进入受体细胞的DNA分子通过复制和表达实现信息的转移,使受体细胞具有了新的遗传性状。

实验结果展示:

实验流程:

1. 取一管感受态细胞,置于冰上融解;
2. 将DNA分子加入到感受态细胞的离心管中,轻弹混匀,冰上放置30 min;
3. 42℃水浴热激30 s,立即取出,置于冰上迅速冷却3 min;
4. 离心管中加入500 μL LB液体培养基(不含有抗生素),37℃,200 rpm培养1 h;
5. 取适量培养液均匀涂在含有Amp抗生素的LB固体培养基平板上,37℃培养12~16 h;
6. 在超净台中挑取LB固体培养基平板中大小均匀的单克隆于1 mL含有Amp的LB液体培养基中,37℃,200 rpm培养4 h;
7. 取2 μL菌液进行PCR验证,用1%的琼脂糖凝胶对PCR产物进行电泳检测。

送样运输要求

1. 组织、细胞:-80℃保存,干冰运输;
2. 血液:EDTA抗凝管,4℃运输;
3. DNA:体积≥50μl,浓度≥50 ng/μl,4℃运输。
 
 

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